NF-KB-signalering is essentieel bij kankers . Desalniettemin blijft de positie van BRCC3-geassocieerde NF-KB-signaleringsactivering in de meeste blaaskankers gekarakteriseerd. Western blotting en IHC van weefselmicroarray zijn gebruikt om de onregelmatige expressie van BRCC3 in de meeste blaaskankers te onderbouwen .
Ontwikkelingscurve, kolonievorming, comfortabele agar-assay en xenograft-etalagepop zijn uitgevoerd om de positie van BRCC3-overexpressie of knock-out bij de meeste blaaskankers vast te stellen . Er zijn aanvullende RNA-Seq- en luciferase-reportertesten gebruikt om de stroomafwaartse signaleringsroute vast te stellen.
Ten slotte zijn co-immunoprecipitatie en fluorescentie confocale test uitgevoerd om het exacte doel van BRCC3 te bevestigen. Hier ontdekten we dat primaire expressie van BRCC3 tumorigenese bevorderde door middel van concentratie op het TRAF2-eiwit.
BRCC3-expressie is bij de meeste blaaskankerpatiënten opwaarts gereguleerd, wat een schadelijke prognose betekent. Door in vitro en in vivo testen ontdekten we dat genetische BRCC3-ablatie de proliferatie, levensvatbaarheid en migratie van de meeste blaaskankercellen aanzienlijk blokkeert .
Mechanistisch laat RNA-Seq-evaluatie zien dat NF-KB-signalering naar beneden wordt gereguleerd in BRCC3-deficiënte cellen. BRCC3 bindt aan en synergiseert met TRAF2 om NF-KB-signalering te activeren. Onze resultaten wijzen erop dat primaire BRCC3-expressie NF-KB-signalering veroorzaakt door zich te concentreren op TRAF2 voor activering, wat op zijn beurt tumorigenese bij de meeste blaaskankers vergemakkelijkt . Deze factoren ontdekken BRCC3 als een mogelijk doel bij de meeste blaaskankerpatiënten .
Instelling van Tree Shrew Animal Mannequin voor Kaposi’s Sarcoom – Gerelateerd Herpesvirus (HHV-8) Een infectie
Kaposi- sarcoom- geassocieerd herpesvirus (KSHV) is de meest voorkomende verklaring voor Kaposi- sarcoom (KS) en verschillende kwaadaardige gezwellen bij mensen . Niettemin heeft het tekort aan een KSHV-geïnfecteerde etalagepop voor kleine dieren het begrip van de mechanismen van KSHV een infectie , virusreplicatie, pathogenese en persistentie belemmerd .
Dit onderzoek was bedoeld om de gevoeligheid van spitsmuizen te ontdekken als een potentiële KSHV-geïnfecteerde etalagepop voor kleine dieren . Een recombinant GFP (latent) / RFP (lytisch) -positieve rKSHV.219 druk werd toegepast om besmetten belangrijkste cellen gekweekt uit geheel andere weefsels van toepaja als in vitro etalagepop en volwassen toepaja als in vivo etalagepop .
KSHV latente kernantigeen (LANA) en DNA werden efficiënt gedetecteerd in belangrijkste cellen van toepaja. Onder hen, boomspitsmuis nier epitheelcellen (TSKEC) zijn waarschijnlijk de meest kwetsbare cellen om KSHV een infectie in vergelijking met de verschillende cellen. KSHV-genomisch DNA, mRNA en KSHV-specifieke eiwitten zijn gemakkelijk gedetecteerd in de TSKEC die tot 32 dpi is gekweekt .
Bovendien , KSHV DNA en mRNA-transcriptie zijn bovendien gemakkelijk gedetecteerd in het perifere bloed mononucleaire cellen (PBMCs) en talrijke weefsels van toepaja verontreinigd met KSHV. Kleuring met hematoxyline en eosine (HE) bevestigde lymfocytinfiltratie, focale aggregatie van lymfoïde weefsel , verdikking van de alveolaire wand, hepatocytoedeem, levernecrose in de milt, long en lever van met KSHV geïnfecteerde dieren.
Bovendien , immuun-histochemische ( IHC ) kleuring bevestigd die LANA of ORF62-positieve cellen zijn huidige in de milt, longen, lever en nieren van KSHV geïnfecteerde toepaja. Hier , hebben we efficiënt opgericht in vitro en in vivo KSHV latente een infectie in de boom spitsmuizen.
Deze etalagepop voor kleine dieren is niet alleen nuttig om de pathogenese van KSHV in vivo te achterhalen, maar kan een nuttige etalagepop zijn om transmissieroutes van virale infecties te controleren en een nuttig platform om de nieuwe therapieën voor KSHV te karakteriseren .
Amplificatie van RAD54B bevordert de ontwikkeling van hepatocellulair carcinoom door activering van de Wnt/β-catenine-signalering
Lever meeste vormen van kanker werd gerapporteerd aan de zesde meest worden regelmatig geïdentificeerd meeste vormen van kanker , en hepatocellulair carcinoom (HCC) is goed voor 75% -85% van de belangrijkste lever meeste vormen van kanker . De concrete moleculaire mechanismen van HCC- ontwikkeling blijven echter onduidelijk, wat cruciaal is om op te helderen. Het expressieprofiel van RAD54B in HCC werd gemeten met behulp van qPCR en western blotting.
Bovendien , de mate van RAD54B in paraffine ingebedde monsters werden onderzocht onder toepassing van immunohistochemie ( IHC ). De impact van RAD54B op de ontwikkeling van HCC werd aangetoond door in vitro experimenten en in vivo orthotope xenograft tumor- experimenten .
De mechanismen van RAD54B die HCC- ontwikkeling verkopen , zijn onderzocht door middel van moleculaire en prestatie- experimenten. Hierin worden RAD54B sterk opgereguleerd in HCC weefsels en cellen sporen elk van mRNA en eiwit varieert en RAD54B kunnen servers als onpartijdige prognostische parameter van 5-jaar totale overleving en 5-jaars ziektevrije overleving voor patiënten met HCC.
Bovendien zal opwaartse regulatie van RAD54B het vermogen tot in vitro cellevensvatbaarheid en -motiliteit en in vivo intrahepatische metastase van HCC-cellen drastisch verhogen . Mechanistisch bevordert RAD54B de HCC- ontwikkeling door middel van het moduleren van de wnt/β-catenine-signalering.
Met name kan het blokkeren van de wnt / β-catenine-signaleringsas de activerende resultaten van RAD54B op de beweeglijkheid van HCC-cellen tegengaan . Bovendien , aanvullende evaluatie illustreert dat DNA amplificatie is waarschijnlijk een van de mechanismen waardoor mRNA overexpressie van RAD54B in HCC. Onze bevindingen wijzen erop dat RAD54B misschien een veelbelovende potentiële prognostische marker is en een kandidaat therapeutisch doel om HCC te verhelpen .
Nucleair probleem IB wordt gedownreguleerd in vulvair plaveiselcelcarcinoom (VSCC): Ontrafelen van differentieel tot expressie gebrachte genen in VSCC door middel van evaluatie van genexpressiedatasets
Vulvair plaveiselcelcarcinoom (VSCC) bevat twee verschillende etiopathologische subtypes: i) Humaan papillomavirus (HPV)-gerelateerd VSCC, dat ontstaat door de precursor overmatige graad squameuze intra-epitheliale laesie (HSIL); en ii) HPV-onafhankelijke VSCC, die ontstaat door voorloper, gedifferentieerde vulvaire intra-epitheliale neoplasie (dVIN), gepusht door TP53- mutaties.
Niettemin is het mechanisme van carcinogenese van VSCC slecht begrepen. De onderhavige onderzoeken doel te bereiken waarneming in VSCC carcinogenese door het uitzoeken differentieel tot expressie gebrachte genen (DEGS) voor elke VSCC subtype. De expressie van zekere DEG’s werd vervolgens verder beoordeeld door immunohistochemie ( IHC ) uit te voeren op complete weefselcoupes van VSCC en zijn voorlopers.
Statistische evaluatie van microarrays werd uitgevoerd op twee onpartijdige datasets voor genexpressie (GSE38228 en een onderzoek van Erasmus MC) op VSCC en reguliere vulva. Er zijn DEG’s erkend die in elke dataset gelijk (omhoog / omlaag) zijn gereguleerd met statistische significantie. Voor HPV-gerelateerde VSCC’s vormde dit 88 DEG’s en voor HPV-onafhankelijke VSCC’s omvatte dit 46 DEG’s.
IHC werd uitgevoerd op VSCC (n=11), dVIN (n=6), HSIL (n=6) en regulier vulvair weefsel (n=7) met i) tekentransducer en activator van transcriptie 1 (STAT1; een opgereguleerde DEGs ); ii) nucleaire kwestie IB (NFIB; een gedownreguleerde DEG); iii) p16 (om de HPV-status van weefsels te achterhalen ); en iv) p53 (ter onderbouwing van de histologische diagnoses).
Stevige en diffuse NFIB-expressie werd opgemerkt in de basale en para-basale lagen van regulier vulvair weefsel , terwijl NFIB-expressie minimaal of volledig schadelijk was in dVIN en in elk subtype van VSCC. Ter onderscheiding werd geen waarneembaar onderscheid opgemerkt in STAT1-expressie tussen regulier vulvaire weefsel , dVIN, HSIL of VSCC.
Door gebruik te maken van bio-informatica, onderzoeken de huidige erkende DEG’s die de analyse van VSCC-carcinogenese kunnen vergemakkelijken. De uitkomsten bevelen aan dat NFIB wordt gedownreguleerd in VSCC en de relevantie ervan als diagnostische/prognostische biomarker verdient aanvullende verkenning.
